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P4級生物實驗室建設(shè)與實驗臺的關(guān)系
時間 : 2021-10-20 14:18:48 閱讀 : 174
生物安全在全球現(xiàn)已遭到越來越多的注重,特別是非典型肺炎(SARS)和高致病性禽流感迸發(fā)以來,國內(nèi)從專家學(xué)者到普通百姓都認(rèn)識到我國在生物安全范疇面臨的嚴(yán)峻形勢,而在此曾經(jīng),我國沒有一家P4級實驗室,P3級實驗室也不行標(biāo)準(zhǔn),這種情況嚴(yán)重限制了我國對生物安全范疇的研討及相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)運用。衛(wèi)生部現(xiàn)已頒布了針對生物安全實驗室的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》(WS233-2002),其首要內(nèi)容基本上是參照美國國立衛(wèi)生研討院 (NIH)及美國疾病控制中心(CDC)的標(biāo)準(zhǔn)擬定的,用于輔導(dǎo)各級生物安全實驗室的規(guī)劃、制作及運用。
P3實驗室用于內(nèi)源性和外源性病源(若因暴露而吸入該病源會引發(fā)嚴(yán)重的、或許致死的疾病)的研討作業(yè)。總體來看,實驗人員應(yīng)在處理致病性的和或許使人致死的病源方面受過專業(yè)訓(xùn)練,并由對該病源作業(yè)有經(jīng)歷的、有資歷的科學(xué)作業(yè)者監(jiān)督。一切與傳染源操作有關(guān)的步驟,都應(yīng)在生物安全柜或其他物理防范設(shè)備中進行,或由穿戴適宜防護服及設(shè)備的實驗人員進行。實驗室須通過特殊規(guī)劃和施工。以下來看看實驗室的幾個具體要求:
首先,P3實驗室的地址選擇要脫離建筑物內(nèi)的行走區(qū),制止隨意進入實驗室。進入走道后,至少要通過兩道自動門,才華進入實驗室。一切的門都應(yīng)有鎖,過道里能夠規(guī)劃一個更衣室便于實驗人員替換實驗防護服。實驗人員除了要穿上實驗防護服外,在處理傳染源、感染動物及被污染的儀器時,有必要戴手套。進入內(nèi)有感染動物的房間時,還應(yīng)采取呼吸和面部維護辦法。
實驗室內(nèi),門口鄰近應(yīng)安裝一個全自動洗手池。在處理病源的區(qū)域,墻面、地面、天花板表面應(yīng)潤滑防水,接縫密封,對實驗室常用化學(xué)試劑和消毒劑具有耐腐蝕性,易于清洗、消毒。地板注意整體性及防滑,主張在地板凹處運用掩蔽罩。實驗桌應(yīng)能承受預(yù)期的重量,其表面材料應(yīng)能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿及其它消毒的化學(xué)物質(zhì)。整體布局時要注意,實驗桌、安全柜以及各設(shè)備間的空間應(yīng)便于清掃。
實驗室應(yīng)有管道排氣系統(tǒng),風(fēng)向從“潔凈區(qū)”到“污染區(qū)”。排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內(nèi)的任何其他區(qū)域。外部排氣口要遠(yuǎn)離有人區(qū)、進風(fēng)口,否則需通過HEPA過濾。實驗人員有必要證明進入實驗室的風(fēng)向是正確的。主張在實驗室的入口處設(shè)置可視的監(jiān)督設(shè)備,表明和證明進風(fēng)的風(fēng)向。要考慮安裝HVAC控制系統(tǒng),避免實驗室持續(xù)正向增壓。一同應(yīng)安裝聲響報警設(shè)備,警告實驗人員HVAC系統(tǒng)出了問題。而且至少每年要測驗HEPA系統(tǒng),保證作業(yè)正常。
有關(guān)傳染源的一切操作、感染動物的驗尸、從感染動物或胚胎卵收集組織或液體等,都應(yīng)在二級或三級生物安全柜中進行。生物安全柜的放置地址應(yīng)遠(yuǎn)離門、房間通風(fēng)百葉窗和實驗室內(nèi)行走區(qū)。應(yīng)至少每年都通過測驗和認(rèn)證,保證由安全柜排出的、經(jīng)HEPA過濾器過濾的空氣,可進入實驗室循環(huán)。當(dāng)二級生物安全柜通過建筑物排氣系統(tǒng)排出空氣時,安全柜的排氣管路的聯(lián)接應(yīng)避免對安全柜的空氣平衡或建筑物排氣系統(tǒng)的空氣平衡發(fā)生干擾。當(dāng)運用III級生物安全柜時,要和排氣系統(tǒng)直接聯(lián)接。若三級安全柜和供氣系統(tǒng)相連,應(yīng)避免安全柜正向增壓。
當(dāng)操作不能在生物安全柜中進行時,應(yīng)運用個人防護設(shè)備如口罩、面罩等防范裝備。而實驗室中的其它配套儀器也以配有安全罩,密閉設(shè)備或其它物理防范設(shè)備為宜。如帶安全罩或密封回頭的離心機,帶安全罩的生物反響系統(tǒng)等,詳見本文后邊的相關(guān)描繪。
處理實驗廢物的設(shè)備最好放在實驗室內(nèi)(即高壓鍋、化學(xué)消毒劑、焚燒爐和其他可行的消毒辦法)。廢物運出實驗室時應(yīng)當(dāng)密封,不該通過公共通道運送。
此外,實驗室的光線應(yīng)適于開展一切的作業(yè),避免反光和亮光,避免阻礙視覺。實驗室還應(yīng)當(dāng)配有眼睛沖刷設(shè)備。
關(guān)于建立P3/P4生物安全實驗室所需的設(shè)備都有一些特殊要求,現(xiàn)將一些首要的和常用的設(shè)備列舉如下:
1)二級/三級生物安全柜
P3/P4實驗室的二級安全柜須有外排系統(tǒng),要求外排空氣通過徹底有用過濾后排入大氣。
2)離心機
P3/P4實驗室的離心設(shè)備要求應(yīng)該帶有防氣溶膠的密封蓋或在安全罩里操作。這方面,德國EPPENDORF公司的5804/5810系列高速離心機符合最嚴(yán)峻的IEC 1010-2-020安全標(biāo)準(zhǔn),保證離心操作的高度安全,而市面上其它離心機廣泛只到達(dá)的一般強制性IEC1010-2標(biāo)準(zhǔn)。
3)高壓滅菌鍋
日本Tomy的程控式自動蒸汽消毒柜悉數(shù)選用程序自動控制,有低水位報警設(shè)備,不僅滿足實驗室標(biāo)準(zhǔn)化操作要求,而且為上蓋式規(guī)劃,不銹鋼原料,易于消毒及清洗。最重要的是當(dāng)壓力上升時有自動硅條封門,更加安全。
4)超低溫冰箱
丹麥Heto-Holten A/S的-85℃立式超低溫冰箱具有一起的層板冷卻功用,能更好的維護樣品。
法國Jouan Robotics的全自動冰箱Molbank(4℃或-20℃)/Biobank(-80℃)可通過電腦軟件控制內(nèi)置的機械手完結(jié)把樣本從自動敞開的小門放到指定方位,或從指定方位取樣本等操作,一同,樣本的身份也被機械手所配的條碼閱讀器所辨認(rèn),然后完結(jié)操作的可追蹤性。該冰箱內(nèi)部規(guī)劃科學(xué),可用于微孔板、深孔板和試管架等多種樣品存儲,并由計算機自動編碼,辨認(rèn)方位及保存信息,還可與Thermo CRS機械手聯(lián)用完結(jié)外部搬運,與其他儀器聯(lián)機,完結(jié)全自動操作,最大極限地避免人為失誤。
5)凍干設(shè)備
其首要設(shè)備凍干機要求一切接口密閉出色,引薦全不銹鋼無縫冷阱,有用捕捉水蒸氣,易于消毒,經(jīng)久耐用。
6)其它常規(guī)設(shè)備
此外,還有一些實驗室常規(guī)設(shè)備:如勻漿器、混勻器、攪拌器、超聲破碎儀、組織研磨器和微量加樣器等,都需求依據(jù)生物安全實驗室的要求進行定時消毒,清洗,因而除了功用安穩(wěn),防泄漏,易于消毒和清洗是首要的考察目標(biāo)。
7)核酸檢測專用設(shè)備-定量PCR系統(tǒng)
關(guān)于病原體核酸的檢測,定量PCR是近年來廣泛選用的技術(shù),特別針對SARS,禽流感病毒,登革熱等主體為核酸的病毒致病源,定量PCR靈敏度高,操作簡便、快速,不論在疾病研討或檢測方面都有很好的運用。
一、實驗區(qū)域行為規(guī)范
1.不得在實驗室飲食、儲存食物、飲料等個人生活物品;不得做與實驗、研究無關(guān)的工作。
2.整個實驗室區(qū)域制止吸煙(包括室內(nèi)、走廊、電梯間等)。
3.未經(jīng)實驗室管理部門容許不得將外人帶進實驗室。
4.了解急迫情況下的逃離路線和急迫應(yīng)對辦法,清楚急救箱、救活器材、急迫洗眼裝置和沖淋器的位置。銘記急救電話119/120/110。
5.堅持實驗室門和走道疏通,最小化存放實驗室的試劑數(shù)量,未經(jīng)容許制止儲存劇毒藥品。
6.脫離實驗室前須洗手,不可穿實驗服、戴手套進入餐廳、圖書館、會議室、辦公室等公共場所。
7.堅持實驗室潔凈規(guī)整,實驗結(jié)束后實驗用具、器皿等及時洗凈、烘干、入柜,室內(nèi)和臺面均無很多物品堆積,每天至少整理一次實驗臺。
8.實驗工作中碰到疑問及時請教該實驗室或儀器設(shè)備責(zé)任人,不得盲目操作。
9.做實驗期間制止長期脫離實驗現(xiàn)場。
10.晚上、節(jié)假日做某些危險實驗時室內(nèi)有必要有二人以上,以保實驗安全。
二、化學(xué)品的儲存保管
1.全部化學(xué)藥品的容器都要貼上明晰永久標(biāo)簽,以標(biāo)明內(nèi)容及其潛在危險。
2.全部化學(xué)藥品都應(yīng)具有物品安全數(shù)據(jù)清單。
3.了解所運用的化學(xué)藥品的特性和潛在危害。
4.關(guān)于在儲存過程中不安穩(wěn)或易形成過氧化物的化學(xué)藥品需加注特別標(biāo)記。
5.學(xué)藥品應(yīng)儲存在適宜的高度,通風(fēng)櫥內(nèi)不得儲存化學(xué)藥品。
6.裝有腐蝕性液體容器的儲存位置應(yīng)當(dāng)盡可能低,并加墊收集盤,以防傾灑引起安全事故。
7.將不安穩(wěn)的化學(xué)品分隔儲存,標(biāo)簽上標(biāo)明購買日期。將有可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的藥品試劑分隔儲存,以防相互作用產(chǎn)生有毒煙霧、火災(zāi),乃至爆炸。
8.揮發(fā)性和毒性物品需要特別儲存條件,未經(jīng)容許不得在實驗室儲存劇毒藥品。
9.在實驗室內(nèi)不得儲存很多易燃溶劑,用多少領(lǐng)多少。未運用的整瓶試劑須放置在遠(yuǎn)離光照、熱源的當(dāng)?shù)亍?/span>
10.觸摸危險化學(xué)品時有必要穿工作服,戴防護鏡,穿不露腳趾的滿口鞋,長發(fā)有必要束起。
11.不得將腐蝕性化學(xué)品、毒性化學(xué)品、有機過氧化物、易自燃品和放射性物質(zhì)保存在一起,特別是漂白劑、硝酸、高氯酸和過氧化氫。
三、有機溶劑的運用
許多有機溶劑如果處理不當(dāng)會引起火災(zāi)乃至爆炸。溶劑和空氣的混合物一旦燃燒便敏捷延伸,火力之大能夠在瞬間點燃易燃物體,在氧氣足夠(如氧氣鋼瓶漏氣引起)的當(dāng)?shù)刂?,火力更猛,可使一些不易燃物質(zhì)燃燒。當(dāng)易燃有機溶劑蒸氣與空氣混兼并到達(dá)一定的濃度規(guī)模時,乃至?xí)l(fā)生爆炸。
運用易燃有機溶劑時,需留心以下事項:
(1)將易燃液體的容器置于較低的試劑架上。
(2)堅持容器密閉,需要傾倒液體時,方可翻開密閉容器的蓋子。
(3)應(yīng)在沒有火源并且通風(fēng)杰出(如通風(fēng)櫥)當(dāng)?shù)剡\用易燃有機溶劑,但留心用量不要過大。
(4)儲存易燃溶劑時,應(yīng)該盡可能減少存儲量,以免引起危險。
(5)加熱易燃液體時,最好運用油浴或水浴,不得用明火加熱。(6)運用易燃有機溶劑時應(yīng)特別留心運用溫度和實驗條件,表1為常用易然有機溶劑的燃點、自燃溫度、燃燒濃度規(guī)模。
(7)化學(xué)氣體和空氣的混合物燃燒會引起爆炸(如3.25克丙酮氣體燃燒釋放的能量相當(dāng)于10g炸藥),因此燃燒實驗需謹(jǐn)慎操作。
(8)運用過程中,需警覺以下常見火源:明火(本生燈、焊槍、油燈、壁爐、點火苗、火柴)、火星(電源開關(guān)、磨擦)、熱源(電熱板、燈絲、電熱套、烘箱、散熱器、可移動加熱器、卷煙)、靜電電荷。
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